神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒

通用名称：神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒
英文名称：NF-light®(Neurofilament light) ELISA

产品规格：96T

预期用途
神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒能在脑脊液中定量检测人神经丝轻链（NF-L）蛋白。该抗体与大鼠、牛和猕猴的神经丝轻链交叉反应，故可用于上述种类的检测。

神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒使用酶免法定量检测人脑脊液中的神经丝轻链NF-light）。该实验使用两种高特异性的非竞争性单克隆抗体。

神经丝是神经细胞主要的细胞骨架成分。对于保持轴突口径和形态的完整十分重要，影响着神经传输的速率和准确性。存在着三种不同的神经丝链，根据其大小而定义，分别为神经丝轻链、神经丝中链和神经丝重链。神经丝轻链组成了重链的骨架，重链聚集形成了神经丝纤维。由于直接的或者缓慢的退化过程，受损的神经细胞内容物释放至周边的隔室，所以可以定量检测轴突蛋白。升高的神经丝轻链水平已发现在各类退行性疾病中，例如肌萎缩性[脊髓]侧索硬化、、和在动物模型中的慢性实验性自身免疫性脑脊髓炎。

检测原理

神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒利用ELISA夹心法原理。一种特异性单克隆抗体包被在固相表面并连接神经丝。通过使用另一种酶标记的单克隆抗体进行检测。通过酶促反应使无色的底物液转化为有色产物，颜色的强度与样本中神经丝含量成正比。

检测步骤

所有分析试剂应在使用前置于室温。

每次清洗循环后，应将盘子与吸水纸擦干。以800转/分的转速搅动制动盘非常重要。

1. 用等量（1+1）样品稀释剂（SAMDIL）稀释CSF样品，使其总最小体积达到210μl。根据标准稀释表重新配制和稀释的标准品可随时使用（即不应进一步稀释）。

2. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗要使用的孔。在下一个洗涤周期之前，可以通过敲击吸收材料的板来吸出或去除添加的洗涤缓冲液。

3. 每种标准品加100μL，一式两份。在室温（20-25℃）下温育1小时。

4. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。

5. 向每个孔中添加100μl新鲜稀释的示踪抗体。在室温（20-25℃）下温育45分钟。

6. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。

7. 向每个孔中添加100μl新稀释的酶联物。在室温（20-25℃）下温育30分钟。

8. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。

9. 在每口孔中加入100μl TMB。在室温（20-25℃）下温育15分钟。

10. 向每个孔中添加50μl的终止液，并读取450nm（参考波长620-650nm）处的吸光度。

注意：终止液具有腐蚀性。

使用免疫分析软件包可以自动计算结果。4参数Marquardt转换提供了 的曲线拟合（见下面的典型标准曲线）。如果没有这样的免疫分析软件可用，则根据已知标准浓度（450减去620）下绘制的平均OD计算神经丝轻链蛋白浓度。

储存及效期
神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒储存于2-8℃，远离高温或者直接的光照。 自生产之日起有效期为18个月。
试剂盒一旦开启，该酶标板应在开封后的4周使用，确保密封干燥保存。

神经丝轻链蛋白试剂盒组成成分

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