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- 发布日期: 2019-09-03
- 更新日期: 2020-05-21
品牌: | 德国IBL | CAS编号: | |
产地: | 德国 | 样本: | 血清、血浆 |
标记物: | 应用: | 可用于定量测定人血清和血浆中的HMGB1含量 | |
检测方法: | ELISA | 检测限: | 定量 |
数量: | 大量 | 货号: | ST51011 |
纯度: | 液体 % | 用途范围: | 科研 |
规格: | 96T | 是否进口: | 是 |
人高迁移率族蛋白测定试剂盒(ELISA)
通用名称:人高迁移率族蛋白测定试剂盒(ELISA法)
英文名称:HMGB1 ELISA
产品规格:96T
预期用途
高迁移率族蛋白B1试剂可用于定量测定人血清和血浆中的HMGB1含量。此外,该试剂盒可用于来自牛,猪,兔,小鼠和大鼠的血清,血浆和脑脊液(CSF)的研究。也可以检测细胞培养基和BALF(支气管肺泡液)。
前言简介
HMGB1是大约30kDa的蛋白质,是非组蛋白核蛋白组的主要成分。HMGB1(高迁移族Box1蛋白)是转录调节因子,通常存在于哺乳动物细胞的细胞核和细胞质中。
HMGB1在恶性疾病等疾病的发病机理中起重要作用。在肿瘤的情况下,细胞的氧供应可以断开。 这导致细胞死亡(坏死)和释放HMGB1,进而导致在相邻肿瘤环境中形成朝向肿瘤的血管生成。这些血管确保肿瘤的存活和进一步的生长。
体外研究表明,通过定量测定HMGB1浓度,可以区分病理性细胞死亡(坏死)和生理细胞死亡(细胞凋亡)。在坏死中观察到更高的HMGB1值。
HMGB1在脓毒性休克后期也起重要作用。 结果表明,即使在脓毒性休克后期,HMGB1在动物实验中的抑制显着提高了啮齿动物的存活率。
HMGB1通过与RAGE(“晚期糖基化终产物的受体”)结合起作用,具有与细胞因子TNF-α和IL-6相似的促炎作用。 脓毒症患者血清中也可见高值。
血液中的HMGB1浓度在许多其他疾病中也增加,包括类风湿性关节炎(RA)急性肺损伤(ALI)和弥散性血管内凝血(DIC)。
HMGB1 ELISA由Ikuro Maruyama博士和Shino-Test Corporation(日本)开发。本产品由Shino-Test公司授权的IBL制造。
检测原理
HMGB1 ELISA是用于定量测定血清和血浆中HMGB1的夹心酶免疫测定。 微量滴定板孔用纯化的抗HMGB1抗体包被。样品中的HMGB1特异性结合固相的抗体,并被第二个酶标记的抗体识别。底物反应后,HMGB1浓度由颜色强度决定。
高迁移率族蛋白B1试剂组成成分
数量 | 标签 | 组成 |
1 x 12 x 8 | MTP | 微孔板可拆卸,包被有抗HMGB1多克隆抗体 |
1 x | ENZCONJ LYO | 酶标记物冻干粉含有与过氧化物酶结合的HMGB1,2 。 |
1 x | CAL LYO | 标准品 冻干粉含有猪HMGB1 ,稀释见章节10.1 |
1 x | CONTROL+ LYO | 阳性质控 冻干粉含有猪HMGB1 ,稀释见章节10.1 |
1 x 20 mL | DILBUF | 稀释液即用型,含有:缓冲液,0.01 % NaN3. |
1 x 12 mL | ENZCONJ DIL | 酶标记物稀释液即用型,含有:缓冲液 |
2 x 100 mL | WASHBUF CONC | 洗涤液 5X浓缩含有:磷酸盐缓冲液,<0.5 %Tween 20. |
1 x 6 mL | COLREA A | 底物液A即用型。含有:TMB |
1 x 6 mL | COLREA B | 底物液B即用型,含有:0.005M的过氧化氢 |
1 x 12 mL | COLOUR STOP | 终止液即用型,含有:0.35M硫酸 |
2 x | FOIL | 盖板膜 |
检测所需材料(未提供)
1. 微量移液器(Multipette Eppendorf或类似设备,CV <3%)。 体积:10; 20; 100; 100-1000μL
2. 涡街搅拌机
3. 轨道摇床(500 rpm)
4. 8通道微量移液器
5. 洗瓶,自动或半自动微量滴定板清洗系统
6. 能够读取450nm吸光度的酶标仪(参考波长600-650nm)
7. 双蒸水或去离子水
8. 纸巾,吸头和定时器
9. 聚苯乙烯(PS)或聚丙烯(PP)管用于标准和样品稀释
10. + 37°C和+ 25°C孵育箱
储存条件
高迁移率族蛋白B1试剂在环境温度下运输,储存应在2-8℃。 远离热源或阳光直射。 样品和制备的试剂的储存和稳定性在相应的章节中有描述。开封的微量滴定板条在试剂盒的有效期限内保持稳定,但应在密封的袋子中储存在2-8℃。
样本要求
本试剂盒可用于检测血清、血浆(EDTA作为抗凝剂)
应注意静脉穿刺的通常预防措施。在1000g离心15分钟后,立即从血液收集装置收集血清/血浆。 如果离心不足或血清/血浆与血细胞接触相当长的一段时间,HMGB1水平可能由于细胞溶解而增加。 | ||||
保存 | 2-8°C (等分分装) | -30°C (等分分装) | -80°C (等分分装) | 避免热源和阳光直射,避免反复冻融 |
稳定性 | 24h | 6个月 | 12个月 |
HMGB1也可以在细胞培养上清液,脑脊液(CSF)和支气管肺泡液(BALF)中测量。在胎牛血清(FBS)中的细胞培养上清液的情况下,测量的是牛HMGB1。 因此,也应该测试阴性对照。
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