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乙酰胆碱受体抗体试剂盒
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  • 发布日期: 2019-09-03
  • 更新日期: 2020-05-21
产品详细说明
品牌: 德国GA CAS编号:
产地: 德国 样本: 血清
标记物: 应用: 定量测定人血清中乙酰胆碱受体抗体(AChR Ab)浓度
检测方法: ELISA 检测限: 定量
数量: 大量 货号: 3104
纯度: % 用途范围: 科研
规格: 96T 是否进口:

乙酰胆碱受体抗体测定试剂盒(ELISA法)


通用名称:乙酰胆碱受体抗体测定试剂盒(ELISA法)

英文名称Medizym® anti-AChR

产品规格:96T


预期用途

用于定量测定人血清中乙酰胆碱受体抗体(AChR Ab)浓度。乙酰胆碱受体(AChR)的自身抗体是重症肌无力神经肌肉接头衰竭的原因,这是一种神经肌肉疾病,导致肌肉无力和易疲劳。 这些抗体的测量在疾病诊断和管理中具有相当大的价值。


检测原理

测定系统取决于人血清中AChR AbAChR上类似位点结合的能力,如各种单克隆抗体,如MAb1(包被在ELISA板孔上)和/MAb2/MAb3(用生物素标记)。 在不存在AChR Abs的情况下,在板孔上包被的MAb1AChRMAb2MAb3生物素之间形成复合物。然后通过添加链霉抗生物素蛋白过氧化物酶(SA-POD),底物(TMB)和终止溶液来检测结合的MAb2MAb3生物素。


AChR Abs存在下,MAb1-AChR-MAb2 / MAb3生物素复合物的形成受到抑制,导致结合的SA-POD较少,450nm处的最终吸光度降低。 测试血清中AChR Abs浓度越高,MAb生物素结合的抑制越大。


试剂盒组成成分

微孔板12 X 8包被有ACHR的单克隆抗体

浓缩缓冲液:100ml,可稀释为1000ml

链霉亲和素过氧化物酶(SA-POD:1x 0.7ml,浓缩型可稀释为14.0ml

底物液TMB1×15ml,即用型

终止液:1×10ml,即用型

SA-POD稀释液15ml,即用型

MAb-生物素3瓶冻干粉,AChR单克隆抗体(MAb2MAb3),生物素化

MAb-生物素稀释液15ml,即用型

AChRF:3×0.7ml冻干粉胎儿类型AChR

AChRA:3×0.5ml冻干粉,成人类型ACHR

AChR稀释液:5ml,即用型

C1阴性质控:3ml即用型

CII-CIII阳性质控2×0.7ml,即用型浓度见质控单  

1-4标准品4×0.7ml,即用型浓度见质控单


所需材料(未提供)

精密移液器10 - 100μl

- 多通道移液器

-一次性移液器吸头

-Eppendorf管(1.5 ml

-洗板机

- 微板振动筛(> 500 / min),不是轨道振动筛

- 具有450 nm620690 nm的微板读板器

- 蒸馏水或去离子水

- 吸水纸或纸巾

-封板膜


检测步骤

1.将100μl阴性对照(CI),校准物(1-4),阳性对照(CII,CIII)和测试血清移入单独的1.5ml Eppendorf管中,并做好相应标记。

2.25μl胎儿和成人型AChR混合物(K + L)移入每个Eppendorf管(来自步骤1)并密封管。确保所有液体都在每个管的底部(如果有疑问,将离心管在微量离心机中以10-15,000g离心10秒钟)。轻轻涡旋并在2-8℃下孵育过夜(16-20小时)。

3.使用涡旋混合器轻轻混合来自步骤2的每个样品-AChR混合物管。根据测定方案,将50μl每种样品-AChR混合物移液到相应的孔(A)中,复孔测定。

4.盖上平板并在室温(18-25℃)下孵育60分钟,同时以> 500rpm振摇。

5.通过使用洗板机,或通过在合适的容器上快速翻转板孔框架来弃去板内溶液。用300μl洗涤溶液(稀释的B溶液)洗涤孔3次。在干净的吸水纸上轻轻敲打倒置的板孔以去除多余的洗涤液。

6.向每个孔中加入50μl重构的MAb-生物素溶液(由HJ制备)。

7.盖上平板并在室温(18-25℃)下孵育60分钟,同时以> 500rpm振摇。

8.通过使用洗板机,或通过在合适的容器上快速翻转板孔框架来弃去板内溶液。用300μl洗涤溶液(稀释的B溶液)洗涤孔3次。在干净的吸水纸上轻轻敲打倒置的板孔以去除多余的洗涤液。

9.向每个孔中加入100μl重构的SA-POD(由DG制备)。

10.盖上平板并在室温(18-25℃)下孵育30分钟,同时以> 500rpm振摇。

11.通过使用洗板机,或通过在合适的容器上快速翻转板孔框架来弃去板内溶液。用300μl洗涤溶液(稀释的B溶液)洗涤孔3次。手工洗板情况下,额外多一个洗涤步骤,即在*一次洗板时,用纯净水洗板一出去任何的泡沫。在干净的吸水纸上轻轻敲打倒置的板孔以去除多余的洗涤液。

12.向每个孔中加入100μl底物溶液(E)并立即摇动。

13.在室温下黑暗中孵育30分钟。

14.向每个孔中加入50μl终止溶液(F)。摇动板5秒钟。

15.在添加终止溶液后30分钟内读取450nm处的光密度,以620690nm作为参考波长。


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