利什曼虫Elisa试剂盒

通用名称：利什曼虫Elisa试剂盒

英文名称：Leishmania Elisa kit

产品规格：96T

预期用途

利什曼虫ELISA试剂盒可用于定性筛选血清中的内脏利什曼原虫IgG抗体 。

实验原理

利什曼虫的ELISA试验原理是一个三步温育过程，即第一次温育涉及利什曼虫抗原在ELISA板孔上的包被。在这一步中，任何与抗原反应的抗体都会结合到板孔中。然后，洗净板孔除去测试样品。随后加入酶标记物。在第二次温育时，酶标记物将与任何存在的抗体结合。在第三次温育前，需要充分洗涤板孔。然后加入显色剂四甲基联苯胺（TMB)。酶标记物催化过氧化氢的氧化反应，显色剂变为蓝色。加入终止液后蓝色会变为明亮的黄色。反应即终止。可用酶标分析仪读取实验结果。

利什曼虫ELISA试剂盒成分

◆ELISA板：包被了利什曼虫抗原的微量滴定板,96孔式。

◆酶标记物：1×11ml/瓶，含硫柳泵稳定缓冲液的辣根过氧化物酶（HRP)。

◆阳性质控：1×1ml/瓶，含硫柳泵缓冲液的稀释利什曼虫阳性人血清。

◆阴性质控：1×1ml/瓶，含硫柳泵缓冲液的稀释利什曼虫阴性人血清。

◆TMB底物溶液：1×11ml/瓶，TMB显色剂。

◆浓缩洗涤液20X：1×25ml/瓶，浓缩缓冲液和表面活性剂。

◆稀释缓冲液：2×30ml/瓶，缓冲蛋白溶液。

◆终止液：1×11ml/瓶，浓度为1mol/L的磷酸。

检测步骤

1. 根据待测样品数量加上2个质控品决定所需的板条数，并将其放置在托架上。

2. 加入100μl的阴性质控至1号孔，100μl的阳性质控至2号孔，以及将100μl稀释过的样品（1：40）溶液加入到剩下的孔中。

3. 在室温（15-25℃）下温育10分钟。

4. 震荡甩出洗涤液，并用稀释过的洗涤缓冲液清洗三次。

5. 每孔加入2滴酶标物。

6. 室温下温育10分钟。

7. 震荡甩出洗涤液，并用洗涤缓冲液清洗三次。

8. 每孔加入2滴显色剂。

9. 在室温下温育5分钟。

10. 加入2滴终止液，轻敲ELISA板使孔内溶液混合。

11. 对空气读数调零后读取450nm处的OD值（参考波长620-650nm）

代理商：深圳市科润达生物工程有限公司

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