深圳市科润达生物工程有限公司
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      产品分类
    乙·脑IgM 抗体 检测试剂盒
    • 品牌:德国DRG
    • 产地:德国
    • 货号:EIA4505
    • 发布日期: 2019-09-18
    • 更新日期: 2024-03-28
    产品详请
    产地 德国
    品牌 德国DRG
    货号 EIA4505
    检测方法 ELISA
    规格 96T
    检测限 定性
    数量 1盒
    用途范围 用于人血清中抗重组抗原(来源于JEV)的抗体的检测
    纯度 %
    样本 血清
    应用 科研
    是否进口

    乙 脑IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)


    通用名称:乙 脑IgM抗体检测试剂盒

    英文名称:JE IgM Antibody Detection Kit

    产品规格:96T


    预期用途

    检测日本乙 脑病毒(JEV)的JE(日本乙 脑)IgM检测试剂盒是一用于人血清中抗重组抗原(来源于JEV)的抗体的检测。这一检测有助于人是否感染了JEV的诊断。此试剂盒并不用于血液或血液成分的筛查,仅供科研使用。


    实验原理

    JE IgM酶联免疫吸附试剂盒是一酶促放大的“两步”法夹心酶免 检测试剂。在测试中,JE IgM高质控(代表有免疫活性的血清)、JE低性质控(代表着无免疫活性的血清)与未知的样本血清在微孔板上孵育。血清样品用IgM的样品稀释液进行稀释,然后与包被有抗人IgM抗体的包被板一起孵育,紧接着一部分与乙 脑重组抗原,一部分与与正常细胞抗原孵育,洗板,加HRP标记的酶联物,三次孵育,洗涤后,加底物液,然后加终止液,酶标仪上检测。当吸 光度高于一定值时,JERA和质控品的吸光率可准确地测定JEV抗体是否存在。


    乙 脑IgM抗体检测试剂盒组成

    ◆包被板:96孔包被了抗人IgM的微孔可用来捕获人样品中的IgM抗体。

    ◆样品稀释液, 25ml ,1瓶,用来分析前稀释样本。

    ◆重组抗原(JERA),1支,3ml即用型的JERA。

    ◆正常细胞抗原(NCA):1支,3ml即用型的NCA,即用。

    ◆阴性质控:1瓶,50μl,可用来辅助监测试剂的完整性。

    ◆阳性质控:1瓶50μl,可用来辅助监测试剂的完整性。

    ◆10倍浓缩洗涤液:1瓶, 120ml,内含洗涤步骤中将使用到的洗涤缓冲液。

    ◆HRP酶联物:1瓶, 6ml,内含预稀释好的HRP黄热病毒活性单克隆抗体。

    ◆Enwash:1瓶,20ml,Enwash在加酶联物后的洗板程序之间使用。

    ◆底物液:1瓶,9ml,即用型。

    ◆终止液:1瓶6ml,用来终止酶反应。


    实验步骤

    1. 阳性质控,阴性质控和未知样本应在乙 脑重组抗原和正常细胞抗原试验中做双孔检测。未知样本可以做单孔或双孔检测,但乙 脑重组抗原和正常细胞抗原试验中都必须检测,一个96孔板最多可检测44个样本,具体可参考本节末尾的流程图。

    2. 标记好试验所需包被板。

    3. 用所提供的样品稀释液将待测血清和质控稀释至1/100,用小聚苯乙烯软管完成稀释。至少使用4ul的血清样品,阴性、阳性质控。例如4μl的血清加入396μl的样品稀释液配制出1/100的稀释液。

    4. 用多头或单头的移液管将稀释的样品,低值质控,高值质控各50ul加入相应的微孔中。

    5.用封板胶仅在开放的微孔表面封板,所有板条的底部是不需要覆盖的。

    6.在带有水的潮湿的培养箱中,37℃下保湿温育板条1小时。加湿可以使用孵化器底部的水盘来实现。

    7.孵育后,使用自动洗板机用1X 的洗涤缓冲液洗板6次,每孔300ul。

    8.用多头的移液器在A-D列加入50ul的乙 脑重组抗原,E-H列加入50ul的正常细胞抗原;

    9.用封板胶仅在开放的微孔表面封板,所以板条的底部是没有覆盖的。

    10. 在孵育器中37℃下温育板条1小时。

    11. 在温育后,用自动洗板机洗板6次,每次洗板时每孔使用300μl的洗涤液。

    12. 用多头的移液器每孔加入50μl的HRP标记的酶联物。

    13. 用封板胶仅在开放的微孔表面封板,所以板条的底部是没有覆盖。

    14. 在37℃下避光温育板条1小时。

    15. 温育后,使用洗板液,用自动洗板机洗板6次。

    16. 用头多的移液器在每孔中加入150μl的Enwash。

    17. 不用封板,在室温下温育5分钟。

    18. 在温育后,使用1X的洗板液,用自动洗板机洗板6次。

    19. 用多头的移液管每孔加入75μl的液态TMB底物液。

    20. 不用封板,将微孔板在室温下避光静置10分钟。

    21. 用多头的移液管在每孔中加入50μl的终止液,不用封板,在室温下孵育1min。

    22. 用酶标仪在450nm处读取OD值, 请确保酶标仪不会减去或标准化任何空白值或孔。


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