深圳市科润达生物工程有限公司
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      产品分类
    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒
    • 品牌:IBL
    • 产地:德国
    • 货号:RE56821
    • 发布日期: 2019-12-10
    • 更新日期: 2024-03-28
    产品详请
    产地 德国
    品牌 IBL
    货号 RE56821
    检测方法 ELISA
    规格 96T
    检测限 定性/定量
    用途范围 科研
    纯度 参考说明书%
    样本 血清、血浆
    应用 可用于人血清和血浆中布鲁氏杆菌IgM抗体的定性和定量检测

    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒(酶联免疫法)


    通用名称:布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒(酶联免疫法)

    英文名称:Brucella IgM ELISA

    产品规格:96人份/盒

    产品货号:RE56821

    产品品牌:德国IBL


    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒预期用途

    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒可用于人血清和血浆中布鲁氏杆菌IgM抗体的定性和定量检测。


    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒检测原理

    此固相ELISA试剂盒利用的是夹心法的原理。包被孔内包被了抗原,用对人IgM有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体(此抗体可结合到包被抗原上)。底物反应后,所显示的颜色的强度与检测到的IgM特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。


    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒组成成分

    名称

    数量

    成分

    微孔板12×8包被有特异性抗原
    标准品A~D4×2ml

    1;10;50;200U/mL,即用

    标准品A=阴性质控        标准品B=临界质控

    标准品C=弱阳性质控      标准品D=阳性质控

    内含抗布鲁氏杆菌的IgM抗体,PBS(磷酸缓冲液),稳定剂。

    酶联物1×15ml红色,即用。
    稀释液1×60ml含PBS缓冲液,<0.1%NaN3
    洗涤液1×60ml浓缩型(10×),含PBS缓冲液,吐温20
    底物液1×15ml即用型
    终止液1×15ml0.5M的H2SO4


    所需材料(未提供)

    1)   移液器,体积:5;50;100;500 μL

    2)   校准仪

    3)   样品稀释用试管(1ml)

    4)   带试剂储器8道移液器

    5)   洗涤瓶,自动或半自动洗板机

    6)   能在450nm处读数的酶标仪

    7)   双蒸水或去离子水

    8)   吸水纸,取样吸头和计时器

    9)  RF吸附剂


    储存条件

    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒必须在2~8℃的环境下运输和储存,避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将微孔板密封并储存于2~8℃的环境下时,试剂3个月内稳定。


    样本要求

    血清,血浆(EDTA,肝素)

    按照一般原则进行采血。自样品采集到检测都应保持血液样品的化学完整性。不要使用易容血、血和脂血样品。如果样品出现混浊,实验前应将其离心以除去颗粒物质。

    贮存

    2-8℃

    -20℃

    稳定性

    7天

    >7天

    避免高温和太阳直射,避免反复冻融


    样品稀释

    血清、血浆用稀释液(+ RF吸附剂)按1:101比例稀释。

    例:5ul+500ul稀释液(+ RF吸附剂)。

    如果样品中IgM浓度高于*标准品则应进一步稀释。

    RF吸附剂处理样本:温育时间不要超过20分钟,避免特异性抗体吸附,预处理样本可能会出现混浊。


    布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒检测步骤

    1)加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中,在定性检测中只使用标准品B。

    2)封板后室温(18℃-25℃)温育60分钟。

    3)移去封板纸,弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。

    4)在每一微孔中加入100μL酶联物。

    5)封板后室温(18℃-25℃)温育30分钟。

    6)移去封板纸,弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。

    7)如果有条件的话,可使用8孔微量移液器加底物液和终止液,确保底物液和终止液都是以相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

    8)每孔加TMB底物液100μL。

    9)室温(18℃-25℃)避光温育20分钟。

    10)在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。

    11)加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。


    结果计算

    质量控制

    严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求,所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求,那么实验则无效,必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果,应检查以下问题:试剂有效期,贮存条件,取样器,实验设备,温育时间,清洗方法。


    定性评估

    临界值是直接从标准品B中得出。临界指标(COI)是由样本的平均OD值和临界质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值±20%内,则该样本应判定为可疑样本;OD值高于临界值则为阳性,反之为阴性


    定量评估

    在半对数坐标纸上或自动计算的方法,以标准品的OD值(Y轴,线性)对其浓度(X轴,对数)做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时,应当充分利用好每一个标准品数值(明显逸出的数值应当被忽略,再使用更加合理的数值代替它)。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于*标准品的样品,应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释,并重新检测。


    结果判定

    方法

    U/ml

    说明

    定量

    (标准曲线)

    <8

    阴性

    8-12

    灰区

    >12

    阳性

    定性

    (COI)

    <0.8

    阴性

    0.8-1.2

    灰区

    >1.2

    阳性

    实验结果不能作为任何结果的*依据,必须与临床及诊断检测相结合。


    科润达生物还提供布鲁氏杆菌IgA试剂盒和布鲁氏杆菌IgG试剂盒,可咨询了解。

    代理商:深圳市科润达生物工程有限公司

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