深圳市科润达生物工程有限公司
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      产品分类
    百·日·咳杆 菌 IgA检测 试剂盒
    • 品牌:IBL
    • 产地:德国IBL
    • 货号:RE56131
    • 发布日期: 2019-12-11
    • 更新日期: 2024-03-28
    产品详请
    产地 德国IBL
    品牌 IBL
    货号 RE56131
    检测方法 ELISA
    规格 96T
    检测限 定性/定量
    用途范围 科研
    纯度 参考说明书%
    样本 血清、血浆
    应用 可用于人血清和血浆中百 日咳杆菌IgA的定性和定量检测
    是否进口

    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒(酶联免疫法)


    通用名称:百 日咳杆菌IgA检测试剂盒(酶联免疫法)

    英文名称:Bordetella pertussis IgA ELISA

    产品规格:96T

    产品货号:RE56131

    产品品牌:德国IBL


    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒预期用途

    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒可用于人血清和血浆中百 日咳杆菌IgA的定性和定量检测。


    百 日咳简介

    百 日咳是一种由百 日咳博德氏菌引起的呼 吸道疾病。它主要通过空气传播。这一革兰氏阴性球杆菌可产生一系列的生物学活性分子。典型的有百 日咳毒素(PT),丝状血凝素(FHA)和不同的脂多糖(LPS)。百 日咳有高传 染性,能产生严重的疾病,特别是对年纪非常小的儿童。


    百 日咳感染后的免疫应答或者百 日咳疫苗接种后的接种效果的血清学检测方法有:凝集化验,沉淀素,补体结合以及ELISA。ELISA检测方法简单,易操作并且可同时用于检测血清阳性和通过检测IgM和IgA来确认是否是近期感染。


    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒检测原理

    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒利用的是夹心法。微孔内包被了抗原,用对人IgA有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体(此抗体可结合到包被抗原上)。底物反应后,所显示的颜色的强度与检测到的IgA特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。


    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒组成成分

    4×2ml

    标准品A~D

    标准品A~D

    1;10;20;50U/mL,即用

    标准品A=阴性质控           标准品B=临界质控

    标准品C=弱阳性质控         标准品D=阳性质控

    内含抗百 日咳杆菌IgA抗体,PBS(磷酸缓冲液),稳定剂。

    1×15ml

    酶联物

    红色,待用。内含HRP标记的抗人IgA,蛋白缓冲液,稳定剂。

    1×12×8

    微孔板

    可拆,包被有特异性抗原。

    1×15ml

    底物液

    含TMB

    1×15ml

    终止液

    0.5M的H2SO4

    1×60ml

    稀释液

    含PBS缓冲液,<0.1%NaN3

    1×60ml

    洗涤液

    浓缩型(10×),含PBS缓冲液,吐温20

    封板纸

    用于在温育时遮盖微孔板

    自封袋

    用于储存不用的板条


    所需材料(未提供)

    1、移液器,体积:5;50;100;500 μL

    2、校准仪

    3、样品稀释用试管(1ml)

    4、带试剂储器8道移液器

    5、洗涤瓶,自动或半自动洗板机

    6、能在450nm处读数的酶标仪

    7、双蒸水或去离子水

    8、吸水纸,取样吸头和计时器

    储存条件

    百 日咳杆菌IgA检测试剂盒必须贮存于2~8℃的环境中,避免高温或太阳直射。样品和试剂的贮存和稳定性将在相关章节阐述。开封微孔板在有效期内稳定,但在2~8℃环境下贮存时请把包装袋密封好。


    样品要求

    血清,血浆(EDTA,肝素)

    按照一般原则进行静 脉采血。自样品采集到检测都应保持血液样品的化学完整性。不要使用易容血、黄 疸血和脂血样品。如果样品出现混浊,实验前应将其离心以除去颗粒物质。

    贮存

    2-8℃

    ≤-20℃

    避免高温和太阳直射,避免反复冻融

    稳定性

    2天

    >2天


    检测步骤


    1、加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中,在定性检测中只使用标准品B。

    2、封板后室温(18℃-25℃)温育60分钟。

    3、移去封板纸,弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。

    4、在每一微孔中加入100μL酶联物。

    5、封板后室温(18℃-25℃)温育30分钟。

    6、移去封板纸,弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时,如果有条件的话,可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

    7、每孔加TMB底物液100μL。

    8、室温(18℃-25℃)避光温育20分钟。

    9、在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。

    10、加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。


    结果计算

    质量控制

    严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求,所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求,那么实验则无效,必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果,应检查以下问题:试剂有效期,贮存条件,取样器,实验设备,温育时间,清洗方法。


    定性评估

    临界值是直接从标准品B中得出。临界指标(COI)是由样本的平均OD值和临街质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值上下20%内,则该样本应判定为可疑样本;样本平均OD高于(临界值+临界值×20%)则应判定为阳性;样本平均OD值低于(临界值-临界值×20%)则应判定为阴性。


    定量评估

    在半对数坐标纸上或用自动生成的方法,以标准品的OD值为Y轴,浓度为X轴,绘制一标准曲线图。用立体图、4参数对数图或对数-对数图都可获得良好的实验结果。对于标准曲线图,用标准品的每一单值进行计算(样品结果明显异常的值必须删除掉,应使用更加合理的单值)。样品的浓度可直接从标准曲线上获得。一旦样品稀释了,就应当乘以相应的稀释因子。如果样品所测得的浓度高于*标准,则应根据实验前的准备说明所述对样品进行稀释,并重新检测。


    代理商:深圳市科润达生物工程有限公司

    科润达生物公司还提供百 日咳杆菌IgG试剂盒和百 日咳杆菌IgM试剂盒,更多信息请咨询我们获取资料。