深圳市科润达生物工程有限公司
800-8306296
 
产品中心 首页 >  产品展厅  >  美国Cortez
登革热NS1抗原检测试剂盒(酶联免疫法)
起批量(千克 价格
>0 面议
  • 最低订购量:1千克
  • 发布日期: 2020-06-12
  • 更新日期: 2020-06-12
产品详细说明
保存条件: 2-8°C冷藏 数量:
保质期: 适应物种:
用途范围: 科研 纯度: %
CAS编号: 产地: 美国
品牌: 美国Cortez 规格:
标记物: 样本: 血清
检测方法: 酶联免疫法 应用: 用于登革热病毒的早期检测,通过酶免分析法定性检测人血清中的NS1抗原。
检测限: 货号: 8404-25
是否进口:

登革热NS1抗原检测试剂盒(酶联免疫法)

 

预期用途

此试剂盒用于登革热病毒的早期检测,通过酶免分析法定性检测人血清中的NS1抗原。它可以在IgG和IgM抗体出现之前对人血清中的登革热病毒的进行早期诊断。此试剂盒不能用于筛查血液或血液成分,仅用于研究。

 

前言简介

登革热是一种急性病毒性疾病,它主要通过埃及伊蚊传播。登革热在临床上主要表现为:双相热、皮疹和造血抑制,还可表现出全身症状,如浑身不舒服、关节痛、肌肉疼痛和头痛,有时还可能出现极为罕见的出血性高烧,并可能导致致命性的休克。登革热主要流行于热带和亚热带地区,大概每年会发生100,000,000例。据统计,每年大概会出现5001000万例登革热病人,同时还会出现250000500000例登革热出血热。在2002年,据报道,30多个拉丁美洲的国家出现10000000例登革热病人,并且大多数是登革热出血热(DHF)病人。之后在2003年到2005年,在印度的一些地方也广泛流行DHF。在美国,据报道,DHF病人在19962002年就增加了三倍。据报道说,登革热也在夏威夷和德克萨斯州的拉雷多爆发过。由于病毒的潜在传染性,一些病毒包括登革热都被列为CDDA类潜在传染原。登革热NS1(非结构蛋白)蛋白是一个六聚体分泌的蛋白。它是病毒RNA复制中重要的角色,它强烈的免疫原性引起抗体和补体的活性。在急性感染血液中可检测到NS1抗原。此试剂盒可检测即时感染患者血清中的NS1抗原。

 

实验原理

此试剂盒具有高灵敏度,快速和可靠性分析,采用夹心法检测血清中低含量的NS1。

质控和未知血清样品用样品稀释缓冲液稀释。微孔中包被高效的NS1抗体,封闭,样品中的NS1抗原被捕获,与二抗形成夹心。通过辣根过氧化物酶和TMB底物显色液产生的颜色反应来判断NS1抗原,用酸溶液终止反应,然后用酶标仪在450nm处读取吸收值。阴性和阳性血清测得的值作为样品中NS1抗原的诊断依据。

 

试剂盒组成

1. 微孔板      12×896孔

2. 阴性质控    1x300ul,含有沉淀物的话使用前应离心

3. 阳性质控    1x300ul,含有沉淀物的话使用前应离心

4. 临界质控    1x300ul,检测临界值,含有沉淀物的话使用前应离心

5. 样品稀释液  1x15ml,含有二抗,Proclin(0.02-0.03%)作为防腐剂

6. 酶联物      1x150ul,100X,含有辣根过氧化物酶标记的多*抗体,使用前混匀

7. 酶联物稀释液1x12ml,用于100X酶液的稀释,直接将酶联物加入此溶液即得到100X的酶连液,配制液在2-8℃下可保存2周。未开封的稀释液2-8℃下保存至有效期。

8. 洗涤缓冲液  1x120ml,10X浓缩。

9. 底物液      1x12ml,TMB

10. 终止液      1x6ml,室温下保存至有效期

实验所需材料但试剂盒未提供

1. 酶标仪

2. 去离子水或双蒸水

3. 真空泵

4. 37℃孵箱

5. 1-10ul的单通道移液器,50-200ul单通道和多通道的移液器

6. 聚丙烯试管或96孔稀释板

7. 保鲜膜

8. 计时器

9. 混合器

 

样品采集和准备

1. 此试验只能使用人血清,由于试剂未得到优化,所以不能直接用于全血或血浆的检测

2. 从红细胞凝块中提取出血清,不能使用溶血

3. 样品采集后应尽快进行实验,不要将血清长时间放置在室温下

4. 采取静脉穿刺采血,样品在2-8℃下可保存7天,-20℃或更低温度可保存30天,想要保存更长时间,应贮存在-70℃,避免反复冻融

5. 使用前应将冻存的样品在室温下溶解

6. 如果血清是需运输的,则需根据联邦感染试剂运输法规进行包装运输

 

实验步骤

所有试剂在使用前都应平衡至室温,混匀

试剂准备

1. 1X洗涤缓冲液:120ml的10X的洗涤缓冲液和1080ml的去离子水混合。充分混匀,确保完全溶解。1X的洗涤缓冲液在室温下可保存6个月,使用前应检查其是否被污染,被污染的则应丢弃

2. 微孔板:固定实验所需的微孔条,不用的应保存在密封袋内,贮存在2-8℃下至有效期

3. 酶连液的制备:120uL的100X的酶联物直接加入到12ml的酶联稀释液瓶中,充分混匀,2-8℃下可保存2周,2周后应将其丢弃,不能再用于试验

操作步骤

1. 阳性、阴性和临界质控设置平行样,未知样品可不设置,90个试验样品可在一块板上进行检测。

2. 吸取50ul的样品稀释液至相应的孔内

3. 在含有样品稀释液的孔内加入50ul的未稀释血清,混匀

4. 盖板,37℃下孵育1h

5. 每孔加入300ul1X洗涤液,全自动洗板机洗板6次

6. 用多通道移液器每孔加入100ul的酶联物,丢弃剩余的酶联物或者是保存在2-8℃下至2周

7. 盖板,37℃下孵育30min

8. 全自动洗板机洗板6次

9. 每孔加入100ulTMB底物液

10. 黑暗处,室温下孵育20min

11. 每孔加入50ul的终止液,不盖板,室温下放置1min

12. 酶标仪450nm处读取数据

 

结果计算

未知样品的结果计算,先计算试验临界值,紧接计算样品OD值与临界值之比

 

临界值的计算:计算临界质控样品的OD均值

OD                   

NO1           0.152   

NO2           0.189   

总计              0.341

临界质控平均值=0.341÷2=0.171

ISR的计算:计算样品OD值/临界值,计算每个样品的ISR

如:样品OD值=0.431

样品的ISR=样品OD值÷临界值

样品ISR=0.431÷0.171=2.52

样品状态

ISR

阳性样品

≥1

阴性样品

<1

 

临界值的计算

流行质控血清不能用于临界值的计算,建议用地方性相关人群的血清进行临界核实

 

结果说明OD值≥临界(ISR≥1)认为是阳性,含有NS1抗原。OD值接近临界值的(1.1>ISR>0.9)应重复做一次再来确定。

 

本译文仅供参考,详情请以原文为准。

 

仅供科研使用

 

【国内售后单位】

深圳市科润达生物工程有限公司

办公地址:深圳市坪山区坑梓中兴路中城生命科学园第一分园A栋

联系电话:0755-26814430
客服QQ:3007975839



相关产品
中文名称 单位 CAS号 更新时间 品牌 价格
登革热NS1抗原IgG/IgM抗体快速检测试剂 2020-01-13 美国Cortez 元/千克
登革热NS1抗原IgG/IgM抗体快速检测卡 2020-01-07 Cortez 元/千克
登革热NS1快速检测试剂 2019-10-22 美国Inbios 元/千克
登革热NS1检测试剂盒 2019-10-22 美国Inbios 元/千克
登革热NS1快速检测试剂盒 2019-09-17 美国Inbios 元/千克
登革热NS1抗原检测试剂盒 千克 2019-09-17 美国Cortez 元/千克
登革热NS1快速检测试剂(金标快速法) 2019-09-04 Cortez 元/千克
登革热NS1快速检测卡—澳大利亚Panbio进口原装 2019-09-04 澳大利亚Panbio 元/千克
联系方式
手机:15711973608
电话:800-8306296
Q Q:
Q Q:
扫码添加微信