【医疗器械注册证书编号】

国械注进20163402609

CA72-4(癌抗原72-4)最初被描述为由B72.3识别的抗原因子。B72.3是由相应的原发肿.瘤转移后的膜萃取物免疫杂交生产的鼠单克隆抗体。CA72-4被证实是1MDa的粘液样糖蛋白，合成物称为TAG72（肿.瘤相关抗原72）。TAG72蛋白的分子量为48KD. 血清和血浆中的CA72-4的水平升高见于某些恶性疾病，包括胰、胃、胆、结.肠、乳腺、卵巢、子宫颈、子宫内膜的肿.瘤。它对胃肠道和卵巢的肿.瘤有很高的诊断学的敏感性。尽管在一些良性的疾病如风.湿.病和卵巢囊.肿也发现有CA72-4的升高，但是临床研究表明，对于胃肠道和卵巢肿.瘤，特异性诊断高达95％。CA72-4的水平和肿.瘤的大小及分级紧密关联。CA72-4是胃肠道肿.瘤的患者选择 学的监测和随后的护理的指标。另外合适的指标是CA199和CEA，另外，CA72-4是卵巢肿.瘤的患者选择 学的监测和随后的护理的可靠性指标，尤其是对于CA125阴性的患者。

【检测原理】

DRG公司的TM-CA 72-4酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合CA72-4分子上独特抗原位点的单克隆小鼠抗体。一份含有内源性CA72-4的患者样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗CA72-4抗体。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中CA72-4的浓度成正相关。加入底物溶液后，显出的颜色强度与患者样品中CA72-4的浓度成正比。

【主要组成成分】

1） 微孔板： 12×8孔，可拆，微孔中包被抗CA72-4 单克隆抗体。

2） 标准品（0-4）：5支 0.5ml，即用型，浓度为0，3，20，50，100U/ml，内含无水银防腐剂。

3） 高低质控： 2支 冻干粉，0.5ml，质控品的浓度及范围请见试剂瓶标签或质控单。内含无水银防腐剂。

4） 样品稀释液： 1支，3ml，即用型，内含无水银防腐剂。

5） 酶联物： 1支 1.4ml，10倍浓缩，标记辣根过氧化物酶的抗CA72-4抗体，内含无汞防腐剂。

6） 酶联物稀释液：1支，14ml，即用型型，含无汞防腐剂。

7） 底物液： 1支，14ml，即用型。

8） 终止液： 1支，14ml，即用型，含0.5M的硫酸，避免接触终止液，以免刺激或着烧皮肤。

9） 洗涤液（40X）：1支，30ml。

注意：用于样品稀释的样品稀释液应视需要而定。

实验需要器材（但试.剂盒不提供）

1) 酶标仪(450±10nm)。

2) 移液器

3) 吸水纸

4) 蒸馏水

5) 计时器

6) 坐标纸或是数据处理软件

检测步骤

每次实验都应含有一条标准曲线。

1） 将实验所需数目的板条固定在板架上。

2） 用一次性吸嘴将20μL的标准品﹑质控品和样品加入相应的检测孔中。

3） 每孔加入100μL的新鲜配制的酶联物。 混合十秒，在此步骤里，充分摇匀十分重要。

4） 在室温下温育120分钟。

5） 快速弃去检测孔中的内含物，每孔用400μL洗涤液洗板五次，在吸水纸上用力拍板以除去残留的液体。注意：洗板步骤是否正确将直接影响到实验的灵敏度和 性。

6） 每孔加入100μL的底物液。

7） 在室温下温育30分钟。

8） 每孔加入100μL的终止液终止反应。

9） 在加终止液后十分钟内，室温下，于450±10nm处读取吸光率。

【结果计算】

1） 计算标准品﹑质控品和患者样品的平均吸光率。

2） 以吸光率为Y轴，浓度为X轴，按照从标准品中获得的平均吸光率和其相对应的浓度值，绘制标准曲线。

3） 利用样品的平均吸光率，在标准曲线上得出其相应的浓度值。

4） 自动方法：使用立方函数﹑四参数模式或双对数的计算机程序可得到结果。

5） 样品的浓度可从标准曲线上直接获取。样品的浓度高于最.高标准品的浓度则需进一步稀释。在计算样品的浓度的时候，要乘以稀释倍数。

下面是CA72-4 ELISA的标准曲线的典型例子。

【期望值】

每个实验室必须建立自己的正常值。

以下是利用DRG公司的糖类抗原72-4（CA72-4）测定试.剂盒（酶联免疫法）EIA-5071对正常成年人测试所得到的结果：

【注意事项】

1） 在使用前所有试剂和样品均需平衡至室温，所有试.剂要充分混合但不要起泡。

2） 一旦实验开始，所有步骤都必须进行到底而不能中断。

3） 对每种试.剂﹑标准品和样品使用一次性的吸嘴，以避免交叉污染。

4） 吸光率决定于温育时间和温度，在开始实验前，建议准备好所有的试剂，将需要检测的微孔板固定在板架上，这些步骤保证每次加液步骤所需时间相同而没有中断。

5） 按照一般的规律，酶反应时间与温育时间和温度成线性比例。

【生产企业】

德国 DRG Instruments GmbH

【国内售后单位】

深圳市科润达生物工程有限公司

办公地址：深圳市坪山区坑梓中兴路中城生命科学园A栋

联系电话：0755-26814430