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| 产地 | 德国 |
| 保存条件 | |
| 品牌 | 德国IBL |
| 货号 | RE56441 |
| 用途 | 用于人血清和血浆中流 感A IgG的定性和定量检测。 |
| 检测方法 | 酶联免疫法 |
| CAS编号 | |
| 保质期 | |
| 适应物种 | |
| 检测限 | 仅供体外诊断使用 |
| 数量 | 変量 |
| 包装规格 | |
| 标记物 | |
| 纯度 | % |
| 样本 | 血清或血浆 |
| 应用 | 试剂盒可用于人血清和血浆中流 感A IgG的定性和定量检测。 |
| 是否进口 |
流 感A IgG检测试剂盒（酶联免疫法）
【产品名称】
通用名称：流 感A IgG检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Influenza A IgG ELISA
【产品规格】96T
【预期用途】
试剂盒可用于人血清和血浆中流 感A IgG的定性和定量检测。
【前言简介】
流行性感 冒是呼 吸道的一种急性发热病毒感染。这种感染大多由飞沫传染所致，并成为一种流行病。这一病毒以及它的毒素可导致支气 管黏膜出现严重的炎 症，也可使支 气 管受到损害。1到3天的潜伏期后，感染症 状就会突然出现：之后会出现体温急剧升高，常常还伴随有颤 抖，出现鼻黏膜炎的主要症 状，还会出现令人疼 痛的干 咳，气管 炎，喉 炎和常发性的鼻 炎与结膜 炎。流 感病毒可组成一主要形态学、化学和生物学特性相似的病毒群体。我们将流 感病毒分A、B和C三大类，其中也包括很多其它的变种。根据其核蛋白和基质蛋白的不同抗原性，我们可以区别流 感病毒的不同类型。但实际上起免疫作用的抗原是红细胞凝集素和神经氨酸苷酶。这两种抗原都是表面抗原，都可表现为持久的抗原可变性，叫做转换。因而会出现新的流行性感 冒，而且抗原的可变性可促进它的流行性。流 感病毒类型（A、B和C）的确定给临床医生和流行病学家进行进一步诊断提供了重要指示。因而我们知道了流 感病毒B可导致严重的临床病程，也可使其病毒流行扩散。同样的，在流 感病毒A的传染中，流行病学的价值以及机体保护的检测方法就变得很重要了。
【检测原理】
此固相ELISA试剂盒利用的夹心法，包被板上包被了抗原。用对人IgG具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原上的样品特异性抗体。底物反应后，所显示的颜色强度与检测到的IgG特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线获得。
【主要组成成分】
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4×2ml |
标准品A-D |
1；10；50；150U/mL，待用 标准品A=阴性质控 标准品B=临界质控 标准品C=弱阳性质控 标准品D=阳性质控 内含抗流 感A的IgG抗体，PBS（磷酸缓冲液），稳定剂。 |
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1×15ml |
酶联物 |
红色，待用。内含过氧酶标记的抗人IgG，蛋白缓冲液，稳定剂。 |
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1×12×8 |
微孔板 |
可拆，包被有特异性抗原。 |
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1×15ml |
底物液 |
含TMB |
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1×15ml |
终止液 |
0.5MH2SO4 |
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1×60ml |
稀释液 |
含PBS缓冲液，BSA，＜0.1%NaN3 |
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1×60ml |
浓缩洗涤液 |
浓缩型（10×），含PBS缓冲液，吐温20 |
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2× |
封板纸 |
用于在温育时遮盖微孔板 |
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1× |
自封袋 |
用于储存不用的板条 |
所需材料（未提供）
1） 移液器，体积：5；50；100；500 μL
2） 校准仪
3） 样品稀释用试管（1ml）
4） 带试剂储器8道移液器
5） 洗涤瓶，自动或半自动洗板机
6） 能在450nm处读数的酶标仪
7） 双蒸水或去离子水
8） 吸水纸，取样吸头和计时器
【储存条件】
试剂盒必须贮存于2-8℃的环境中，避免高温或太阳直射。样品和试剂的贮存和稳定性将在相关章节阐述。开封包被板在有效期内稳定，但在2-8℃环境下贮存时请把包装袋密封好。
【样本要求】
血清，血浆（EDTA，肝素）
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按照一般原则进行静 脉采血。自样品采集到检测都应保持血液样品的化学完整性。不要使用易容血、黄 疸血和脂血样品。如果样品出现混浊，实验前应将其离心以除去颗粒物质。 |
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贮存 |
2-8℃ |
≤-20℃ |
避免高温和太阳直射，避免反复冻融 |
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稳定性 |
2天 |
＞2天 |
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【检测方法】
成分准备
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稀释/溶解 |
成分 |
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稀释液 |
比例 |
备注 |
贮存 |
稳定性 |
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20ml |
洗涤液 |
200ml |
双蒸水 |
1：11 |
加热至37°C以溶解结晶，充分混合 |
2-8°C
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8周 |
样品稀释
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样品 |
稀释 |
稀释液 |
比例 |
备注 |
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血清/血浆 |
常规方法 |
稀释缓冲液 |
1：101 |
例：5μL+500μL稀释缓冲液 |
样品中IgG浓度高于*标准品的应当进一步稀释。
检测步骤
1) 加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。
2) 封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。
3) 移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。
4) 在每一微孔中加入100μL酶联物。
5) 封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟
6) 移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时，如果有条件的话，可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生
7) 每孔加TMB底物液100μL。
8) 室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。
9) 在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。
10) 加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。
【结果计算】
质量控制
严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求，所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求，那么实验则无效，必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果，应检查以下问题：试剂有效期，贮存条件，取样器，实验设备，温育时间，清洗方法。
定性评估
临界值是直接从标准品B中得出。临界指标（COI）是由样本的平均OD值和临界质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值±20%内，则该样本应判定为可疑样本；OD值高于临界值则为阳性，反之为阴性
定量评估
在半对数坐标纸上或自动计算的方法，以标准品的OD值（Y轴，线性）对其浓度（X轴，对数）做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时，应当充分利用好每一个标准品数值（明显逸出的数值应当被忽略，再使用更加合理的数值代替它）。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于*标准品的样品，应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释，并重新检测。
结果判定
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方法 |
U/ml |
说明 |
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定量 （标准曲线） |
＜8 |
阴性 |
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8-12 |
灰区 |
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＞12 |
阳性 |
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定性（ COI） |
＜0.8 |
阴性 |
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0.8-1.2 |
灰区 |
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＞1.2 |
阳性 |
实验结果不能作为任何治 疗结果的因素，必须与临床症 状及诊断检测相结合
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