深圳市科润达生物工程有限公司
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【产品名称】
通用名称：促肾上腺皮质激素检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：ACTH

【产品规格】
96T

【预期用途】
试剂盒可用于人血浆中ACTH（促肾上腺皮质激素）的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用

【前言简介】
ACTH(促肾上腺皮质游素)是一种由垂体分泌的并含有39个氨基酸的多肽类激素（分子量＝4500），它可以调节肾上腺皮质类固醇的分泌。垂体前叶ACTH的分泌不仅受负反馈调节机制的控制，也受到中枢的控制。各种各样的压力负反馈到大脑，大脑会以更高的水平来调节下丘脑神经激素的分泌，如促肾上腺皮质激素释放激素（一种41个分子的氨基酸多肽）。而CRH（促肾上腺皮质激素释放素）又会刺激垂体ACTH的分泌。能调节ACTH分泌的另一种多肽是AVP（抗激素）。AVP也会受反馈调节的刺激，并和CRH一起促进垂腺门循环中ACTH的分泌。ACTH会。它是可的松的主要调节器，是男性中最主要的糖皮质激素。当血液可的松水平上升时，ACTH的分泌会直接在垂体水平受到抑制。通过这种相同的机制，可的松水平的降低会导致ACTH水平的上升。具有生物活性的ACTH是由其前体（阿片黑素）通过酶裂解产生的。这种分子（阿片黑素）含有下列激素的氨基酸序列：ACTH、前ACTH、β-促黑激素、促脂素、内啡肽和脑啡肽。因为免疫反应检测的是抗原结构而不是生物活性，所以通用的ACTH RIA检测会与POMC、前ACTH、ACTH和ACTH的片段之间发生交叉反应。像其它垂体激素一样，ACTH上以脉动方式分泌的。这些小小的脉冲会叠加成具有巨大振幅的典型的日变化。在健康的个体中，ACTH在早晨（6：00～8：00）达到*值，在白天和睡眠周期开始时变得*。因为ACTH的这种昼夜节律变化，所以我们通常都在8：00到10：00间收集血浆ACTH样品。但是，的鉴别诊断*是在傍晚（16：00～18:00）收集样品。在和异位性ACTH综合征中，ACTH分泌的节律变化一般不存在。

【临床意义】
血浆ACTH的检测可用于垂体、阿狄森综合征、自主性ACTH（Nelson综合征）、ACTH缺陷性症和异位性ACTH综合征的鉴别诊断。糖皮质激素分泌过多会引起。除用糖皮质激素药物引起的外，其它因素引起的都会伴随24小时尿液可的松增加。引起最常见的因素是双侧肾上腺增生(由于垂体腺瘤或促肾上腺皮质增生而引起的垂体ACTH分泌过多,从而引起肾上腺增生)。实验室常通过下列方法来诊断：（1）通过服用高剂量（2.0mg 6h×8）的地塞米松来抑制血浆ACTH和可的松的浓度；（2）用低剂量的地塞米松（0.5mg 6h×8或1mg 23：30）来抑制ACTH和可的松；（3）对甲吡酮刺激的反应性增加或血浆ACTH水平正常或升高。当是由原发性肾上畸形（肾上腺瘤）引起的时，肾上腺的活动就不会受ACTH的影响，同时垂体ACTH的分泌也会受到抑制，因此对地塞米松的和甲吡酮的刺激作用都没有任何反应。这种的明显的表现为ACTH水平非常低，几乎检测不到。因此，血浆ACTH的检测可用于垂体的鉴别诊断。肾上腺瘤患者的ACTH水平很低；而异位性ACTH综合征患者的ACTH水平很高；双侧肾上腺增生患者，因其皮质过多症（会抑制ACTH）的程度不同，其ACTH水平会不恰当的升高。然而在大多数情况下，ACTH的水平都会在正常值范围内。肾上腺皮质受到破坏或垂体或下丘脑畸形都会造成肾上腺皮质功能不全或可的松分泌不足，结果导至ACTH的分泌不足。原发性肾上腺皮质功能不全和阿狄森综合征明显的表现为血浆ACTH水平升高或肾上腺对外源性ACTH的刺激不敏感。伴随ACTH不足的症，也就是所谓的继发性肾上腺皮质功能不全，它的特征为血浆ACTH和可的松浓度都很低、肾上腺对人工合成产品的刺激反应低于正常反应但通常都表现得很明显。如果要求诊断的或甲吡酮的刺激作用，则ACTH和可的松的的反应肯定会低于正常反应。浸润性ACTH在比侧肾上腺切除前就会出现，它明显的表现为：产生阿狄森氏色素沉积（接受了糖皮质激素替代的肾上腺切除通常都会出现）。在这些中，血浆ACTH的水平都明显得会提高，并且对地塞米松的抑制反应不灵敏。

【检测原理】
DRG公司的ACTH酶联免疫试剂盒采用的是两结合位点ELISA的原理来检测具有生物活性的含39个氨基酸分子的ACTH。此检测实际使用了两中特异性的抗体，第一个是用亲和层析纯化的并能结合到人ACTH上的羊多克隆抗体，另一种是对ACTH分子上特定区域具有特异性的鼠单克隆抗体。其中一种抗体仅能结合到ACTH分子的C-末端（第34-39氨基酸），此抗体用生物素标记了；另一抗体能结合到ACTH分子的中间区域和N-末端（*-24氨基酸），此抗体HRP标记。（如下图）
链亲和素包被板—生物素标记的抗ACTH（34-39）--ACTH--HRP标记的抗ACTH（1-24）
在此检测试剂中，标准品、质控品和样品同时与酶标抗体和生物素标记抗体一起在链亲和素包被的包被板中温育。温育后，洗板以除去未结合的成分，洗板后在加入底物液（TMB）并温育。温育后加入酸性底物液以终止酶促反应，此时溶液颜色变成黄色。黄色的深度直接与样品中ACTH的浓度成正比。用标准品做一条标准曲线，我们可以直接从标准曲线上获取质控品和样品中ACTH的浓度。






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