苯丙氨酸筛查试剂

(德国IBL原装)

RE ： 800 15（480人份）

RE ： 800 19（2400人份）

【产品名称】

通用名称：苯丙氨酸筛查试剂

英文名称：Phenylalanine (PKU) neonatal Screening Assay

【产品规格】

480T、2400T

【前言简介】

(PKU),是一种最常见的氨基酸代谢遗传病,是一种常染色体阴性遗传病,在人群中的为1/2,600—1/25,000。

的主要原因（90—99%病例）是苯丙氨酸羟化酶的活性降低或缺失。苯丙氨酸羟化酶可以使必需氨基酸苯丙氨酸转化为酪氨酸，后者是儿茶酚胺、黑色素和甲状腺激素的前体，由于苯丙氨酸这个代谢的阻断，因而通过旁路代谢转化为苯丙酮酸和乙酸盐，通过*排泄。

    该疾病由于在出生后第一周,代谢抑制就表现出来。因为蛋白质代谢的改变引起大脑神经纤维异常的髓鞘形成对疾病的发展起主要作用。的其它表现有真皮（和附属物）色素沉着的缺乏。是因为黑色素形成的紊乱，因而引起。

在新生儿中对的诊断是重要的,因为可通过低苯丙氨酸膳食避免脑损害。因而测定血中苯丙氨酸浓度的筛查试验，应在出生后2—5天进行，假如为阳性，应通过检测染色体特异的突变来进行确证试验。

为了检验发展了许多筛查试验，最早的试验是由GUTHRIE 发明命名的，以枯草杆菌的生长习性来检测，枯草杆菌只能在高苯丙氨酸浓度生长。因为该方法的许多缺陷被其它的一些试验替代，这些实验是利用血液中的苯丙氨酸参与的化学反应，利用荧光或显色底物，进行测定。也可以应用更可信、更灵敏、更*的高压液相色谱进行检测。

【检测原理】

的干燥血液用3%的三氯乙酸从滤纸上洗脱。

样本中的苯丙氨酸在外加苯丙氨酸脱氢酶的作用下转化成苯丙酮酸，此反应使存在于反应混合物中的辅酶NAD+再生。产生的NADH 使加入的黄色四唑盐发生氧化还原反应生成紫色物质Formazane，在570nm波长测定OD值，OD值与样本中的苯丙氨酸浓度成正比。

【试剂盒组成】（括号内为2400人份）

1. 酶试剂（冻干） 含苯丙氨酸脱氢酶 辅酶NAD⁺、缓冲液、稳定剂 1（5）瓶

2. 酶试剂稀释液 二乙醇胺、缓冲液、0.01%叠氮钠 1瓶 45（220）ml

3. 底物试  含四唑盐 柠檬酸缓冲液 1瓶 55（260）ml

4. 标准品血斑（A—E） 5（25）片

含量 A B  C  D     E

mg/dL 1 3  5  9     13

    5．质控品血斑 2（10）片

质控品1 2-3mg/Dl

质控品2 4-6mg/Dl

    6． 染色贮存液 柠檬黄 1瓶 2(8)ml

用三氯乙酸1：51稀释。

苯丙氨酸筛查试剂盒在常温下运输,在2—8℃贮存.失效期在试剂盒外签上和每种成份的标签上注明.

【试剂配制】

 使用前将全部试剂平衡至室温. 480T的试剂盒可以分成15次做完.

1. 3%三氯乙酸和0.5M NaOH的准确配制.

   注意在配置和使用过程中避免触及皮肤和粘膜.

a. 酶试剂(贮存液)

    将冻干的酶试剂用12ml双蒸水复溶,充分混匀两分钟避免起泡沫。

b. 酶试剂（使用液）

 用酶试剂稀释液稀释酶试剂:3份酶试剂贮存液+10份酶试剂稀释液。充分混匀两分钟，避免泡沫产生，配制的量依本次实验的实际用量而定。

c. 三氯乙酸 3%(w/v)

    用贮存的染色液将3%的三氯乙酸染色。

2ml 贮存染色液+ 100ml 3%的三氯乙酸

      2.  配制的试剂的贮存和稳定性

a. 酶试剂(贮存液)

该试剂在 2—8℃贮存5天。

b. 酶试剂（使用液）

该试剂在18-25℃贮存8小时.

c.室温下稳定，直至有效期。

3. 试剂盒的处理

 试剂盒的处理必须依据国家的行政法规.可参考IBL的网页上的方法.

【样本要求】

1.  收集  血样应在出生第2天至第3天间（出生后48小时至72小时）采集。

  采集时间不能早于出生后36小时，也不能晚于出生后72小时。早于36小时可能会出现假阴性。

新生儿足根血只能从足底的中部或后部收集.不采取放血.足跟放血的第一滴应使用无菌纱布拭去。

用采血卡接触一大滴血于预先划定的圆圈。重复采血时应在采血卡上另换地方。

注意：放血时不能挤压周围组织，以避免挤压造成的溶血或被组织液的稀释。不许用采血卡同一部位多次使用。不许接触或污染血斑。将所采血斑在室温下（避免太阳光直射）3小时风干。

2.  贮存

    苯丙氨酸干血片在2—8℃ 可贮存6个月。