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| 产地 | 美国 |
| 保存条件 | |
| 品牌 | 美国Raybio |
| 货号 | ELH-TNFa |
| 用途 | 细胞培养上清液中的TNF-a的含量 |
| 检测方法 | ELISA |
| CAS编号 | |
| 保质期 | |
| 适应物种 | |
| 检测限 | 定量 |
| 数量 | 大量 |
| 英文名称 | |
| 包装规格 | 96T |
| 标记物 | |
| 纯度 | % |
| 样本 | 细胞上清 |
| 应用 | 科研 |
| 是否进口 | 是 |
人TNF-α检测试剂盒（ELISA）
产品名称
通用名称：人肿 瘤坏死因子-a检测试剂盒（ELISA法）
英文名称：RayBio® Human TNF-alpha ELISA Kit
品 牌：美国Raybio
产品规格
96T
肿 瘤坏死因子-a检测试剂预期用途
RayBio®人TNF-α ELISA试剂盒采用体外酶联免疫吸附测定法，定量测定人血清（正常血清和血浆中的人TNF-α浓度低，在该测定中可能无法检测到），血浆和细胞培养上清液中的TNF-a的含量。
前言简介
肿 瘤坏死因子-a检测试剂盒使用包被有人TNF-α特异性抗体的96孔酶标板，标准品和样品被加入到孔中，样品中存在的TNF-α通过固相的抗体与孔结合。洗涤后加入生物素化的抗人TNF-α抗体。 洗去未结合的生物素化抗体后，将HRP-标记的链霉素加入到到孔中。 再次洗涤板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物显色与所结合的TNF-α量成比例。 加入终止液颜色从蓝色变为黄色，并且在450nm处测量颜色的吸光度值。
肿 瘤坏死因子-a检测试剂盒组成成分
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组分 |
表述 |
储存/预准备后稳定性 |
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TNF-a酶标板（项目A） |
12*8=96孔，包被有抗人TNF-a抗体 |
4℃ 1个月 |
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浓缩洗涤液（20x）（项目B） |
20x浓缩溶液 25ml |
4℃ 1个月 |
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标准蛋白（项目C） |
2瓶人类TNF-α。1个小瓶就够配制每个一式两份的标准品。 |
-80℃1个月 |
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检测抗体TNF-α（项目F） |
2瓶生物素化的抗人TNF-α。 每个小瓶足以测定微板的一半。 |
4℃ 5天 |
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浓缩HRP-链霉亲和素（项目G） |
200μl600X浓缩HRP缀合链霉亲和素 |
不能保存和重新使用 |
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一步法TMB底物（项目H） |
TMB溶液 |
N/A |
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终止液（项目I） |
8ml 0.2M硫酸 |
N/A |
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测定稀释剂A（项目D） |
30ml稀释缓冲液，0.09％叠氮化钠防腐剂。 |
N/A |
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测定稀释剂B（项目E） |
15ml 5X浓缩液 |
4℃ 1个月 |
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将未使用的板条重新装回到含有干燥剂包的袋中，沿着整个边缘重新密封。 |
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检测步骤
1.使用前将所有试剂和样品置于室温（18 - 25oC）。建议所有标准和样品至少重复一次。
2.根据您的实验标记可拆卸的8孔条。
3.分别加入样品和每个标准品100μl（参见试剂制备步骤3）到适当的板孔中。盖上盖子，室温温和振荡孵育2.5小时
4.弃去溶液，用1X洗涤液洗涤4次。使用多通道移液器或自动洗板机洗板，每孔加入洗涤缓冲液（300μl）。每个步骤中去除液体对于良好的性能是至关重要的。洗完后，通过吸取或倾析清除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置板并用干净的吸水纸吸干印迹。
5.每孔加入100μl1X制备的生物素化抗体（试剂制备步骤6）。在室温下温和振荡孵育1小时。
6.弃去溶液。重复洗涤，如步骤4。
7.加入100μl制备的链霉亲和素溶液（见试剂制备步骤7）。在室温下温和摇动孵育45分钟。
8. 弃去溶液。 重复洗涤，如步骤4。
9.向每个孔中加入100μlTMB一步底物试剂（项目H）。在室温下在黑暗中轻轻振荡孵育30分钟。
10.向每个孔中加入50μl终止液（项目I）。 立即读取450 nm处吸光度值。
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