登 革热IgG试剂盒（ELISA）

通用名称：登 革热IgG试剂盒（ELISA）

英文名称：Dengue virus IgG ELISA

产品规格：96T

预期用途

登 革热IgG试剂盒可用于人血清、血浆中抗登 革热病毒IgG抗体的定性检测。

检测原理

IgG抗体的定性酶免 检测利用的ELISA技术。微孔板上预先包被了结合样品相关抗体的登 革热病毒2型抗原。洗板除去未结合的样品物质后 ，加入辣根过氧酶标记的抗人IgG酶联物。这一酶联物可与捕获到的登 革热病毒特异性抗体结合。加入能产生蓝色反应产物的TMB底物液后，如果显示蓝色则可知已形成免疫复合物。所显示颜色的强度与样品中登 革热病毒特异性IgG抗体的量成正比。加入硫酸以终止反应,以便产生黄色的终点颜色。用一酶标仪在450m处读取OD值。

登 革热IgG试剂盒组成成分

◆微孔板：12×8可拆板条，包被有登 革热2型抗原，真空密封于铝铂金属袋中。

◆样品稀释液：1瓶，内含100ml样品稀释用缓冲液，pH2±0.2，液体为黄色，待用，白盖。

◆终止液：1瓶，内含15ml硫酸，0.2mol/l；待用，红盖

◆洗涤液（20×浓缩）：1瓶，50ml，含20倍浓缩的样品洗涤液，pH7.2±0.2，白盖

◆酶联物：1瓶，蓝色，待用，黑盖。

◆底物液：1瓶，含15ml，待用，黄盖。

◆登 革热 IgG阳性质控：1瓶，2ml；黄色，待用，红盖

◆登 革热 IgG临界质控：1瓶，3ml；黄色，待用，绿盖

◆登 革热 IgG阴性质控：1瓶，2ml；黄色，待用，蓝盖

检测步骤

请至少做以下几个孔：

1孔（例A1）做空白对照孔，1孔（例B1）做阴性质控。

2孔（例C1+ D1）做临界质控，1孔（例E1）做阳性质控。

1）控品和已稀释好的样品分别100μl加入到相应的微孔中，留下A1做空白对照孔。

2）盖板。

3）37±1℃下温育1h±5min

4）温育后，移去粘性金属板，弃取孔内反应液，用300μl洗涤液洗板3次。避免反应孔中的液体溅出。每次洗板间的浸润时间都应大于5秒。*在吸水纸上拍干。

5）除空白孔外，在每一微孔中都加入100μl登 革热抗IgG酶标物，盖板。

6）室温下温育30，避免太阳直射

7）重复步骤4

8）在每一微孔中加入100μlTMB底物液

9）室温下（20-25℃）避光温育15min

10）按加TMB底物液的顺序和速度在每一微孔中加入100μl终止液。温育之后，包被板内试剂的颜色由蓝色变为黄色

11） 加终止液后30min之内在450/620nm处读取OD值。

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