利什曼原虫IgG ELISA试剂盒

通用名称：利什曼原虫IgG ELISA试剂盒

英文名称：Leishmania IgG ELISA kit

产品规格：96T

预期用途

利什曼原虫IgG ELISA试剂盒可用于人血清中抗内脏利什曼原虫IgG的筛查检测。

实验原理

在第一次温育时，血清中的抗体结合到检测孔的抗原上。在第二次温育时，酶复合物可结合到抗原抗体复合物上。洗板除去未结合的酶联物，加入显色剂，有酶联物和过氧化物酶的情况下会显示蓝色。之后加入终止液终止酶反应，此时溶液由蓝色变成黄色。

利什曼原虫IgG ELISA试剂盒成分

◆包被板：包被了利什曼原虫抗原的微孔板，96孔。

◆酶联物：1瓶，内含11ml，参考说明书。

◆阳性质控：1瓶，内含1ml 稀释好的利什曼原虫阳性人血清和含硫柳汞的缓冲液。

◆阳性质控：1瓶，内含1ml 稀释好的利什曼原虫阴性人血清和含硫柳汞的缓冲液。

◆显色剂：1瓶，内含11ml TMB显色剂。

◆浓缩洗涤液：20倍浓缩，内含25ml浓缩的缓冲液和含硫柳汞的表面活性剂。

◆稀释缓冲液：2瓶，内含30ml含硫柳汞的蛋白缓冲液。

◆终止掖：1瓶，内含11ml 1M的硫酸。

检测步骤

1.取出实验所需数目的板条并置于板架上。

2.在微孔1中加入100ul阴性质控，微孔2中加入100ul阳性质控，剩余的孔中分别加入100ul 40倍稀释的样品。

3.注意：阴性质控和阳性质控都是以预先稀释好了的，不必再稀释。

4.室温温育10min。

5.弃取孔内反应液，用洗涤液洗板3次。

6.在每一微孔中加入2滴酶联物。

7.室温温育10min。

8.弃取孔内反应液，用洗涤液洗板3次。

9.在每一微孔中滴加2滴显色剂。

10.室温温育5分钟。

11.在每一微孔中滴加2滴终止液，振板以使溶液混合均匀。

12.加终止液后450nm处读取OD值（参考波长：620-650）。

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