布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒（酶联免疫法）

通用名称：布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Brucella IgG ELISA

产品规格：96人份/盒

产品货号：RE56841

产品品牌：德国IBL

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒预期用途

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒可用于人血清和血浆中布鲁氏杆菌IgG抗体的定性和定量检测。仅用于科研使用。

前言简介

布鲁氏菌病是由短小椭圆体，革兰氏阴性菌引起的传染病．常见布鲁氏杆菌的有4种：布鲁氏杆菌，马耳他布鲁氏杆菌，猪布鲁氏杆菌，犬布鲁氏杆菌．一般情况下，人是通过接触感染的动物或食用受感染动物的肉或未经高温消毒的牛奶而感染的．受感染的人群不会相互传染．此病的潜伏期为1至3周，有些个体为2个月．布鲁氏杆菌和马耳他布鲁氏杆菌是导致布鲁氏菌病和马尔他热的病原体。典型的布鲁氏菌病表现为周期性发热，，．有些人体中，不同的关节和器官会出现．马尔他热是一种流行性布鲁氏菌病，几乎所有感染的患者都会表现出．布鲁氏杆菌也能引起布鲁氏杆菌肝炎。并且怀疑感染布鲁氏杆菌与(脑脊髓)的存在一定的联系。

抗生素或慢性感染个体中，用常规方法检测血液，尿液，脑脊液，唾液和其他体液中布鲁氏杆菌，会得到阴性的检测结果．用血清学方法，如凝集反应，补体结合反应，布鲁氏杆菌库姆斯氏试验和酶联免疫法都是检测布鲁氏杆菌的不错选择．可通过监测体内抗体来分辨感染的程度，初期只能观察到IgM免疫球蛋的出现．随着的持续，IgM抗体持续下降，IgG上升呈主导作用．在慢性布鲁氏菌病，个体中可能会经历更长时间的，体内才会产生IgG。

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒检测原理

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒利用的是夹心法的原理。包被孔内包被了抗原，用对人IgG有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体（此抗体可结合到包被抗原上）。底物反应后，所显示的颜色的强度与检测到的IgG特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。

储存与稳定性

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。试剂盒开封后，有效期为3个月。

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒组成成分

实验所需材料但试剂盒不提供

1、移液器，体积：5；50；100；500 μL

2、校准仪

3、样品稀释用试管（1ml）

4、带试剂储器8道移液器

5、洗涤瓶，自动或半自动洗板机

6、能在450nm处读数的酶标仪

7、双蒸水或去离子水

8、吸水纸，取样吸头和计时器

检测方法

洗涤液

20ml洗涤液用180ml双蒸水稀释，比例1:10

如有晶体，加热至37℃以除去晶体，充分混合

2-8℃下，8周稳定。

样品稀释

血清、血浆用稀释缓冲液按1:101比例稀释

例：5ul+500ul稀释缓冲液

如果样品中IgG浓度高于*标准品则应进一步稀释。

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒检测步骤

1）加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。

2）封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。

3）移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

4）在每一微孔中加入100μL酶联物。

5）封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。

6）移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

7）如果有条件的话，可使用8孔微量移液器加底物液和终止液，确保底物液和终止液都是以相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

8）每孔加TMB底物液100μL。

9）室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。

10）在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。

11）加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。

结果计算

质量控制

严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求，所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求，那么实验则无效，必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果，应检查以下问题：试剂有效期，贮存条件，取样器，实验设备，温育时间，清洗方法。

结果判定

定性评估

临界值是直接从标准品B中得出。临界指标（COI）是由样本的平均OD值和临界质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值±20%内，则该样本应判定为可疑样本；OD值高于临界值则为阳性，反之为阴性。

定量评估

在半对数坐标纸上或自动计算的方法，以标准品的OD值（Y轴，线性）对其浓度（X轴，对数）做一条标准曲线。使用三次回归或点对点曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时，应当充分利用好每一个标准品数值（明显逸出的数值应当被忽略，再使用更加合理的数值代替它）。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于*标准品的样品，应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释，并重新检测。

结果判定

此检测结果并不是任何结果判定的*因素，它应当结合临床观察和诊断结果加以判断。

除此以外，科润达生物还提供德国IBL品牌的布鲁氏杆菌IgA试剂盒和布鲁氏杆菌IgM试剂盒。

代理商：深圳市科润达生物工程有限公司 

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