布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒（酶联免疫法）

通用名称：布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Brucella IgM ELISA

产品规格：96人份/盒

产品货号：RE56821

产品品牌：德国IBL

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒预期用途

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒可用于人血清和血浆中布鲁氏杆菌IgM抗体的定性和定量检测。

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒检测原理

此固相ELISA试剂盒利用的是夹心法的原理。包被孔内包被了抗原，用对人IgM有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体（此抗体可结合到包被抗原上）。底物反应后，所显示的颜色的强度与检测到的IgM特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒组成成分

所需材料（未提供）

1)   移液器，体积：5；50；100；500 μL

2)   校准仪

3)   样品稀释用试管（1ml）

4)   带试剂储器8道移液器

5)   洗涤瓶，自动或半自动洗板机

6)   能在450nm处读数的酶标仪

7)   双蒸水或去离子水

8)   吸水纸，取样吸头和计时器

9)  RF吸附剂

储存条件

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒必须在2~8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将微孔板密封并储存于2~8℃的环境下时，试剂3个月内稳定。

样本要求

血清，血浆（EDTA，肝素）

按照一般原则进行采血。自样品采集到检测都应保持血液样品的化学完整性。不要使用易容血、血和脂血样品。如果样品出现混浊，实验前应将其离心以除去颗粒物质。

样品稀释

血清、血浆用稀释液（+ RF吸附剂）按1:101比例稀释。

例：5ul+500ul稀释液（+ RF吸附剂）。

如果样品中IgM浓度高于*标准品则应进一步稀释。

RF吸附剂处理样本：温育时间不要超过20分钟，避免特异性抗体吸附，预处理样本可能会出现混浊。

布鲁氏杆菌IgM检测试剂盒检测步骤

1）加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。

2）封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。

3）移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

4）在每一微孔中加入100μL酶联物。

5）封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。

6）移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

7）如果有条件的话，可使用8孔微量移液器加底物液和终止液，确保底物液和终止液都是以相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

8）每孔加TMB底物液100μL。

9）室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。

10）在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。

11）加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。

结果计算

质量控制

严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求，所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求，那么实验则无效，必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果，应检查以下问题：试剂有效期，贮存条件，取样器，实验设备，温育时间，清洗方法。

定性评估

临界值是直接从标准品B中得出。临界指标（COI）是由样本的平均OD值和临界质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值±20%内，则该样本应判定为可疑样本；OD值高于临界值则为阳性，反之为阴性

定量评估

在半对数坐标纸上或自动计算的方法，以标准品的OD值（Y轴，线性）对其浓度（X轴，对数）做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时，应当充分利用好每一个标准品数值（明显逸出的数值应当被忽略，再使用更加合理的数值代替它）。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于*标准品的样品，应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释，并重新检测。

结果判定

实验结果不能作为任何结果的*依据，必须与临床及诊断检测相结合。

科润达生物还提供布鲁氏杆菌IgA试剂盒和布鲁氏杆菌IgG试剂盒，可咨询了解。

代理商：深圳市科润达生物工程有限公司

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