百 日咳杆菌IgG检测试剂盒（酶联免疫法）

通用名称：百 日咳杆菌IgG检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Bordetella pertussis IgG ELISA

产品规格：96T

产品货号：RE56141

产品品牌：德国IBL

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒预期用途

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒可用于人血清和血浆中百 日咳杆菌IgG的定性和定量检测。

百 日咳简介

百 日咳是一种由百 日咳博德氏菌引起的呼 吸道疾病。它主要通过空气传播。这一革兰氏阴性球杆菌可产生一系列的生物学活性分子。典型的有百 日咳毒素（PT），丝状血凝素（FHA）和不同的脂多糖（LPS）。百 日咳有高传 染性，能产生严重的疾病，特别是对年纪非常小的儿童。

百 日咳感染后的免疫应答或者百 日咳疫苗接种后的接种效果的血清学检测方法有：凝集化验，沉淀素，补体结合以及ELISA。ELISA检测方法简单，易操作并且可同时用于检测血清阳性和通过检测IgM和IgA来确认是否是近期感染。

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒检测原理

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒利用的是夹心法。微孔内包被了抗原，用对人IgG有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体（此抗体可结合到包被抗原上）。底物反应后，所显示的颜色的强度与检测到的IgG特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒组成成分

所需材料（未提供）

1、移液器，体积：5；50；100；500 μL

2、校准仪

3、样品稀释用试管（1ml）

4、带试剂储器8道移液器

5、洗涤瓶，自动或半自动洗板机

6、能在450nm处读数的酶标仪

7、双蒸水或去离子水

8、吸水纸，取样吸头和计时器

储存条件

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒必须贮存于2~8℃的环境中，避免高温或太阳直射。样品和试剂的贮存和稳定性将在相关章节阐述。开封微孔板在有效期内稳定，但在2~8℃环境下贮存时请把包装袋密封好。

样品要求

血清，血浆（EDTA，肝素）

检测方法

成分准备

样品稀释

样品中百 日咳杆菌IgG的量如果比*标准品还高的应当用进一步稀释。

百 日咳杆菌IgG检测试剂盒检测步骤

1、加100μL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。

2、封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。

3、移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

4、在每一微孔中加入100μL酶联物。

5、封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。

6、移去封板纸，弃去孔中液体。用300μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时，如果有条件的话，可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

7、每孔加TMB底物液100μL。

8、室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。

9、在每一微孔中加入100μLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。

10、加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。

结果计算

质量控制

严格按照实验步骤的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求，所有的标准品浓度都必须在一个可以接受的范围内。如果其标准不符合要求，那么实验则无效，必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果，应检查以下问题：试剂有效期，贮存条件，取样器，实验设备，温育时间，清洗方法。

定性评估

临界值是直接从标准品B中得出。临界指标（COI）是由样本的平均OD值和临街质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值上下20%内，则该样本应判定为可疑样本；样本平均OD高于（临界值＋临界值×20%）则应判定为阳性；样本平均OD值低于（临界值－临界值×20%）则应判定为阴性。

定量评估

在半对数坐标纸上或用自动生成的方法，以标准品的OD值为Y轴，浓度为X轴，绘制一标准曲线图。用立体图、4参数对数图或对数-对数图都可获得良好的实验结果。对于标准曲线图，用标准品的每一单值进行计算（样品结果明显异常的值必须删除掉，应使用更加合理的单值）。样品的浓度可直接从标准曲线上获得。一旦样品稀释了，就应当乘以相应的稀释因子。如果样品所测得的浓度高于*标准，则应根据实验前的准备说明所述对样品进行稀释，并重新检测。

代理商：深圳市科润达生物工程有限公司

科润达生物还提供百 日咳杆菌IgA试剂盒和百 日咳杆菌IgM试剂盒，想了解更多信息，可咨询我们获取资料。